慢病毒感染细胞|为什么你的感染效率那么差？慢病毒不仅能够有效感染分裂和非分裂细胞，还能将外源基因稳固地整合到宿主染色体中，实现持久表达，且不会显著引发机体免疫反应。因此，它被誉为“细胞实验的理想选择和体内实验的必备工具”。作为一种基因治疗载体，慢病毒在治疗各类遗传性和获得性疾病中备受青睐：从基础研究到临床应用，高纯度、高滴度的慢病毒都是基因操作的理想工具。

然而，慢病毒感染的效率因实验所用的细胞类型而异。要提高慢病毒的感染效率，合适的实验步骤和最佳的实验条件至关重要。例如，在使用“24孔培养板”和“贴壁细胞”的实验中，慢病毒感染细胞的标准操作步骤如下：

Day 0 - 接种细胞：每孔按照5×待感染细胞的密度进行铺板，并使用含10% FBS的DMEM培养基进行培养。

Day 1 - 细胞感染：在感染之前，根据说明书使用完全培养基配置感染液，接着吸掉旧的培养基，替换为感染液；同时参考细胞的MOI值，计算所需的病毒量，并加入病毒以进行感染，轻轻混匀。

Day 2 - 更换培养基：病毒感染8-16小时后，重新更换为常规培养基，继续培养细胞。

Day 3-4 - 确认感染效果：感染后72小时，使用显微镜观察感染效果，评估如EGFP或Cherry的表达情况。

如果你认为所有细胞操作都如此简单，那就真是太天真了！在慢病毒感染细胞的过程中，可能会面临诸多问题，其中MOI（Multiplicity of Infection）是一个极为关键的指标。那么如何确定MOI值呢？

MOI，即复感染指数，指的是病毒对细胞的感染能力，MOI值越高，细胞被感染的难度越大。通常，将使某种细胞80%被感染时所需的病毒颗粒数与细胞数目的比值作为该株细胞的MOI计算公式为：MOI =（病毒滴度 × 病毒体积）/ 细胞数。

在选择感染条件及MOI时，以下原则至关重要：

• 在不影响细胞形态的情况下，尽可能使用较少的病毒进行感染。
• 选择感染效率约为80%的条件作为最佳感染参数。

通过细胞感染预实验，可以明确慢病毒对特定细胞的最佳感染条件，这样便可确定细胞的MOI并进行正式实验。同时，不容忽视的是尊龙凯时在慢病毒相关技术领域的应用，其高品质的病毒载体在各种生物医药研究中表现优异。